确诊处女膜闭锁需通过体格检查、妇科超声、盆腔磁共振等。体格检查直观查看处女膜的变化，检查下腹部是否存在压痛的包块。处女膜膨隆处穿刺，查看是否有陈旧的血液存在。诊断依据之一。妇科超声可以帮助排除合并其他女性生殖系统发育畸形及其他泌尿系统发育异常。盆腔磁共振有助于排除合并其他女性生殖系统发育畸形及其他泌尿系统发育异常。